按分離模式分類(lèi),液相色譜柱主要有以下幾種類(lèi)型:
### 一、正相色譜柱(NPC)
* **特點(diǎn)**:通常使用硅膠作為基質(zhì),通過(guò)極性官能團(tuán)(如CN、NH2)與樣品分子進(jìn)行相互作用。 * **適用范圍**:適用于非極性或弱極性化合物的分離。 * **流動(dòng)相**:使用的流動(dòng)相極性相對(duì)比固定相低,如正乙烷、氯仿、二氯甲烷等。
### 二、反相色譜柱(RPC)
* **特點(diǎn)**:以硅膠為基質(zhì),鍵合非極性基團(tuán)(如C18、C8),是HPLC中最常用的類(lèi)型。 * **適用范圍**:適用于極性化合物的分離。 * **流動(dòng)相**:使用的流動(dòng)相極性較強(qiáng),通常為水、緩沖液與甲醇、乙腈等混合物。樣品流出色譜柱的順序是極性較強(qiáng)組合最先被沖出,而極性弱的組份會(huì)在色譜柱上有更強(qiáng)的保留。
### 三、離子交換色譜柱(IEC)
* **特點(diǎn)**:利用固定相的帶電基團(tuán)與樣品離子進(jìn)行交換。 * **適用范圍**:常用于生物分離和有機(jī)酸堿分析,也可用于分離帶電化合物,如氨基酸、肽類(lèi)等。
### 四、親水性色譜柱
* **特點(diǎn)**:介于正相和反相之間,適用于復(fù)雜樣品的分離,如LC-MS中的應(yīng)用。
### 五、其他類(lèi)型
除了上述主要類(lèi)型外,液相色譜柱還可以根據(jù)特殊需求進(jìn)行分類(lèi),如:
* **強(qiáng)陽(yáng)離子/陰離子交換柱**:專(zhuān)門(mén)用于分離帶電化合物。 * **整體柱**:連續(xù)填充的高聚物體系,具有簡(jiǎn)單制備和高效分離的特點(diǎn)。 * **毛細(xì)管柱**:用于超高效液相色譜(UHPLC),具有超低死體積和高靈敏度。
此外,液相色譜柱還可以按尺寸(如常規(guī)色譜柱、細(xì)管柱/微管柱、半制備柱/制備柱)、粒徑大小(如5μm、3μm、1.7μm等)、材料特性(如硅膠、氧化鋯、有機(jī)多孔共微球等)進(jìn)行分類(lèi)。這些分類(lèi)方式有助于用戶(hù)根據(jù)具體的應(yīng)用需求和樣品特性選擇合適的色譜柱。
綜上所述,按分離模式分類(lèi),液相色譜柱主要有正相色譜柱、反相色譜柱、離子交換色譜柱以及親水性色譜柱等主要類(lèi)型。 |